細胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)是指從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,直徑從40nm到1000nm不等,能將mRNAs從供體細胞轉(zhuǎn)移到受體細胞,并直接調(diào)節(jié)受體細胞的蛋白表達。細胞外囊泡中mRNA的分析為腫瘤的非侵襲性快速診斷提供了前所未有的機遇。
細胞外囊泡的mRNA含量極低且檢測程序復(fù)雜,國家納米科學(xué)中心研究團隊開發(fā)了一種原位檢測細胞外囊泡mRNA的方法,其結(jié)合了基于Förster共振能量轉(zhuǎn)移的脫氧核糖核酸四面體(FRET-based DNA tetrahedron,F(xiàn)DT),用于細胞外囊泡的有效內(nèi)化和靶基因檢測,以及尺寸選擇性熱泳積累用于細胞外囊泡中Förster共振能量轉(zhuǎn)移(Förster resonance energy transfer ,F(xiàn)RET)信號的擴增。這種基于脫氧核糖核酸四面體的熱泳試驗(DNA tetrahedron-based thermophoretic assay,DTTA)通過提取核糖核酸和酶擴增,檢測血清EVs中的前列腺特異性抗原(prostate specific antigen ,PSA)的檢測限為14 aM。DTTA顯示在前列腺癌和前列腺良性增生的鑒別上,細胞外囊泡 PSA mRNA優(yōu)于血清PSA蛋白(曲線下面積:0.93 vs 0.74;42例)。近日,研究團隊將這項研究發(fā)表在《Nano Today》雜志上,題為《Ultrasensitive detection of mRNA in extracellular vesicles using DNA tetrahedron-based thermophoretic assay》。
這一項技術(shù)研究建立了一種超靈敏、快速、無酶的DTTA原位檢測細胞外囊泡PSA mRNA的方法,在鑒別前列腺癌和良性前列腺增生患者時,用前列腺特異性抗原基因作為替代生物標(biāo)志物比血清前列腺特異性抗原蛋白具有更好的診斷準(zhǔn)確性,其可能會極大地擴展DNA納米結(jié)構(gòu)支持的液體活組織檢查的應(yīng)用。



